Abstract
Background: Human papilloma virus 16 (HPV-16) is the most oncogenic type of HPV and it is in the centre of oncogenesis of cervical cancer. The HPV-16 viral load measured in real-time by the cycle threshold (Ct) values of PCR has been suggested as a potential disease severity biomarker.
Material and Methods: A cross-sectional study was conducted 121 females who attended gynecology clinics. The research was conducted in the obstetrics and gynecology units of Fallujah teaching hospitals and the outpatient clinics in Fallujah city. The research was done in the period between September 2025 and January 2026. Assessment of cervical cytology was based on the Bethesda system 2014. The viral load of the virus and HPV-16 were detected using the multiplex real-time PCR of E6/E7 oncogenes. The correlation was tested using GraphPad Prism software.
Results: HPV-16 was found to be most frequently detected with 15.7 (19/121) in general. The statistical significance between HPV-16 positivity and the severity of cytological grade was found to be statistical (p < 0.001). Prevalence of HPV-16 slowly rises to 4.5% in Negative intraepithelial Lesion or Malignancy (NILM) to 67.9% in High-Grade Squamous Intraepithelial Lesions (HSIL). The quantitative analysis demonstrated that such negative correlation of lesion grade and viral load was significant; mean of Ct of HSIL and Atypical Glandular Cells (AGC) were significantly lower than that of NILM (28.42 and 28.16, respectively). High grade lesions could be differentiated well with a Ct cut off of 30 or below.
Conclusion: HPV-16 viral load is a good discriminant against the degree of lesions in the cervix. A large viral load is an excellent indicator of high-grade pathology, which means that quantitative PCR can be used to supplement cytology in the risk stratification.
Material and Methods: A cross-sectional study was conducted 121 females who attended gynecology clinics. The research was conducted in the obstetrics and gynecology units of Fallujah teaching hospitals and the outpatient clinics in Fallujah city. The research was done in the period between September 2025 and January 2026. Assessment of cervical cytology was based on the Bethesda system 2014. The viral load of the virus and HPV-16 were detected using the multiplex real-time PCR of E6/E7 oncogenes. The correlation was tested using GraphPad Prism software.
Results: HPV-16 was found to be most frequently detected with 15.7 (19/121) in general. The statistical significance between HPV-16 positivity and the severity of cytological grade was found to be statistical (p < 0.001). Prevalence of HPV-16 slowly rises to 4.5% in Negative intraepithelial Lesion or Malignancy (NILM) to 67.9% in High-Grade Squamous Intraepithelial Lesions (HSIL). The quantitative analysis demonstrated that such negative correlation of lesion grade and viral load was significant; mean of Ct of HSIL and Atypical Glandular Cells (AGC) were significantly lower than that of NILM (28.42 and 28.16, respectively). High grade lesions could be differentiated well with a Ct cut off of 30 or below.
Conclusion: HPV-16 viral load is a good discriminant against the degree of lesions in the cervix. A large viral load is an excellent indicator of high-grade pathology, which means that quantitative PCR can be used to supplement cytology in the risk stratification.
Keywords
Bethesda System
cervical cytology
Cycle Threshold (Ct)
HPV-16
real-time PCR
Viral Load.
Abstract
يُعد فيروس الورم الحليمي البشري النمط 16 (HPV-16) الأكثر ارتباطًا بإحداث الأورام، ويحتل دورًا محوريًا في تطور سرطان عنق الرحم. وقد طُرح قياس الحمل الفيروسي لهذا النمط باستخدام قيمة العتبة الدورية (Ct) في تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي (Real-Time PCR) كمؤشر محتمل لشدة المرض.
أُجريت دراسة مقطعية شملت 121 امرأة راجعن عيادات أمراض النسائية. نُفذت الدراسة في وحدات النسائية والتوليد في مستشفيات الفلوجة التعليمية والعيادات الخارجية في مدينة الفلوجة، خلال الفترة من أيلول 2025 إلى كانون الثاني 2026. تم تقييم لطاخة عنق الرحم وفق نظام بيثيسدا 2014. كما تم الكشف عن الحمل الفيروسي لفيروس HPV-16 باستخدام تقنية PCR اللحظي المتعدد (Multiplex Real-Time PCR) باستهداف جيني E6/E7أُجري تحليل الارتباط الإحصائي باستخدام برنامج GraphPad Prism.اظهرت
اظهرت النتائج انه تم الكشف عن HPV-16 بنسبة 15.7% (19/121) من الحالات. وُجد ارتباط ذو دلالة إحصائية عالية بين إيجابية HPV-16 وشدة التغيرات الخلوية (p < 0.001). ارتفعت نسبة انتشار الفيروس تدريجيًا من 4.5% في الحالات السلبية للآفات داخل الظهارية أو الخبيثة (NILM) إلى 67.9% في الآفات الحرشفية عالية الدرجة (HSIL). أظهر التحليل الكمي وجود علاقة عكسية ذات دلالة إحصائية بين درجة الآفة وقيم Ct؛ حيث كانت القيم المتوسطة لـ Ct في حالات HSIL وخلايا الغدد الشاذة (AGC) أقل بشكل ملحوظ مقارنةً بحالات NILM (28.42 و28.16 على التوالي). كما تبين أن حد القطع لقيمة Ct ≤ 30 يُعد مناسبًا للتمييز بين الآفات عالية الدرجة.
استنتجت الدراسه انه يُعد الحمل الفيروسي لفيروس HPV-16 مؤشرًا فعالًا للتمييز بين درجات آفات عنق الرحم. إن ارتفاع الحمل الفيروسي يرتبط بوجود آفات عالية الدرجة، مما يشير إلى إمكانية استخدام PCR الكمي كأداة مساندة للفحص الخلوي في تصنيف الخطورة المرضية.
أُجريت دراسة مقطعية شملت 121 امرأة راجعن عيادات أمراض النسائية. نُفذت الدراسة في وحدات النسائية والتوليد في مستشفيات الفلوجة التعليمية والعيادات الخارجية في مدينة الفلوجة، خلال الفترة من أيلول 2025 إلى كانون الثاني 2026. تم تقييم لطاخة عنق الرحم وفق نظام بيثيسدا 2014. كما تم الكشف عن الحمل الفيروسي لفيروس HPV-16 باستخدام تقنية PCR اللحظي المتعدد (Multiplex Real-Time PCR) باستهداف جيني E6/E7أُجري تحليل الارتباط الإحصائي باستخدام برنامج GraphPad Prism.اظهرت
اظهرت النتائج انه تم الكشف عن HPV-16 بنسبة 15.7% (19/121) من الحالات. وُجد ارتباط ذو دلالة إحصائية عالية بين إيجابية HPV-16 وشدة التغيرات الخلوية (p < 0.001). ارتفعت نسبة انتشار الفيروس تدريجيًا من 4.5% في الحالات السلبية للآفات داخل الظهارية أو الخبيثة (NILM) إلى 67.9% في الآفات الحرشفية عالية الدرجة (HSIL). أظهر التحليل الكمي وجود علاقة عكسية ذات دلالة إحصائية بين درجة الآفة وقيم Ct؛ حيث كانت القيم المتوسطة لـ Ct في حالات HSIL وخلايا الغدد الشاذة (AGC) أقل بشكل ملحوظ مقارنةً بحالات NILM (28.42 و28.16 على التوالي). كما تبين أن حد القطع لقيمة Ct ≤ 30 يُعد مناسبًا للتمييز بين الآفات عالية الدرجة.
استنتجت الدراسه انه يُعد الحمل الفيروسي لفيروس HPV-16 مؤشرًا فعالًا للتمييز بين درجات آفات عنق الرحم. إن ارتفاع الحمل الفيروسي يرتبط بوجود آفات عالية الدرجة، مما يشير إلى إمكانية استخدام PCR الكمي كأداة مساندة للفحص الخلوي في تصنيف الخطورة المرضية.
Keywords
نظام بيثيسدا، قيمة العتبة الدورية (Ct)، الخلايا العنقية، فيروس الورم الحليمي البشري-16، تفاعل البوليميراز المتسلسل اللحظي، الحمل الفيروسي.