Abstract
This study includes three parts: isolation of Enterotoxigenic Bacteroid fragilis from 94 stool samples collected from different hospitals in Baghdad city from the beginning of March/2020 to the end of April/2021. Stool samples were streaked on BBE media in an anaerobic condition for 24-48h. Identification of Fragilis was done based on morphological characteristics on BBE media: gray convex small rounded colonies surround black zone colonies and molecular method using specific genes 16S rRNA and bft gene. Results showed 34 Fragilis isolates were positive for the 16S rRNA gene and 5 Fragilis positive for the bft gene were classified as Enterotoxigenic Fragilis (ETBF). ETBF isolate which was positive for the bft gene and 16S rRNA was purified by using the Van Tassel method. 30 male mice were divided into three groups with 10 mice for each group the first group as control, the second group is positive control mice administered daily2% dextran sulfate sodium for 30 days, the third group mice administered by stomach tube 2%DSS for 10 days after 10 days mice administered with 20 µg of bft toxin by stomach tube for 30 days. At the end of the experiment, all groups of mice were killed by euthanized ethics. Tissue samples (liver, intestine, and spleen) from mice were removed. The organs were fixed in 10% neutral buffered formalin for histological techniques. Histopathological changes in the third group, in the liver section of a mouse inoculated with DSS+bft toxin, showed: necrotic hepatocytes and dilated sinusoids with hemorrhage. Histopathological changes in the intestine section of a mouse inoculated with DSS+bft toxin showed: sloughing and degenerated villi and shorten villi. Histopathological changes in the spleen section of a mouse inoculated with DSS+bft toxin showed: amyloid infiltration and all lymphoid follicles depleted with necrotic lymphocytes.
Keywords
Bacteroides fragilis
bft toxin
liver
Abstract
شملت هذه الدراسة ثلاث اجزاء: عزل جرثومة Enterotoxigenic B.fragilis من 94 عينة براز تم جمعها من مستشفيات مختلفة في مدينة بغداد من بداية آذار / 2020 حتى نهاية نيسان / 2021. تم زرع عينات البراز على وسط BBE في حالة لاهوائية لمدة 24-48 ساعة. تم التعرف على بكتيريا B.fragilis بناءً على الخصائص المورفولوجية على وسائط BBE: مستعمرات دائرية صغيرة محدبة باللون الرمادي تحيط بالمنطقة السوداء حول المستعمرات والطرق الجزيئية باستخدام جينات محددة 16S rRNA , bft. اظهرت النتائج34عزلة B.fragilis كانت موجبة لجين 16S rRNA و 5 B.fragilis موجبة لجين bft صنفت على أنها سموم معوية (ETBF). تم تنقية العزلة ETBF التي كانت موجبةللجينات bft و 16S rRNAباستخدام طريقة Van Tassel .تم تقسيم ثلاثين ذكرمن الفئران إلى ثلاث مجموعات مع 10 فئران لكل مجموعة المجموعة الأولى كمجموعة سيطرة .المجموعة الثانية عبارة عن فئران تحكم إيجابية يتم تناولها يوميًا 2٪ كبريتات ديكستران الصوديوم ، فئران المجموعة الثالثة تم إعطاؤها بواسطة أنبوب معدي 2٪ DSS لمدة 10 أيام بعد 10 أيام الفئران تم إعطاؤها 20 ميكروغرامًا من الذيفان bft عن طريق أنبوب المعدةلمدة 30 يوم. في نهاية التجربة ، قُتلت جميع مجموعات الفئران بأخلاق القتل الرحيم. تمت إزالة عينات الأنسجة (الكبد والأمعاء والطحال) من الفئران. تم تثبيت الأعضاء في 10٪ فورمالين مخزون محايد للتقنيات النسيجية.التغيرات النسيجية المرضية في المجموعة الثالثة في الكبد في الفئران أظهرت: خلايا كبدية نخرية وأشباه جيوب متوسعة مصحوبة بنزيف.كما أظهرت التغيرات النسيجية المرضية في الجزء المعوي من الفئران: تقشر وتآكل الزغابات وتقصير الزغابات. أظهرت التغيرات النسيجية المرضيةفي الطحال : تسلل أميلويد (الداء النشواني) وجميع البصيلات اللمفاوية مستنفدة مع الخلايا الليمفاوية النخرية.
Keywords
Bacteroides fragilis
bft toxin
liver.