Abstract
An aqueous two-phase system (ATPS) is a clean alternative for traditional aqueous-organic solvent extraction systems. This technique has proven to be highly effective for extracting and separating mixtures of biomolecules. The present investigation involved the extraction of the invertase enzyme from potato tubers utilizing ATPS. The system applied was: Polyethylene glycol 8000 combined with dipotassium diphosphate (PEG8000/PPH). The study investigated the impact of five factors, namely temperature, PEG8000 concentration, dipotassium phosphate concentration, pH, and the addition of sodium chloride (NaCl) or magnesium sulphate (MgSO4) as a catalyst, on the recovery percentage (%Rec) and partition coefficient (KE) of the invertase of the invertase enzyme in ATPS over the study period. The system achieved a maximum recovery (%Rec) of 87.52% and a maximum partition coefficient (KE) of 7.01 at a temperature of 10°C, with a PEG8000 concentration of 1.5 g/10 ml, a dipotassium phosphate concentration of 2.4 g/10 ml, and a pH of 10. After the addition of neutral salts, the system achieved a maximum %Rec of 91.9% and a maximum KE of 11.34 under the same optimal conditions, and a concentration of MgSO4 of 1 g/10 ml.
Keywords
Aqueous two-phase system
Enzymes
plant source
Potato tuber.
Abstract
يعد النظام المائي ثنائي الطور (ATPS) بديلاً نظيفًا لأنظمة استخلاص مذيبات المياه العضوية التقليدية. أثبتت هذه التقنية فعاليتها العالية في استخلاص وفصل مخاليط الجزيئات الحيوية. تضمن البحث الحالي استخلاص إنزيم الإنفرتيز من درنات البطاطس باستخدام ATPS النظام المطبق: هوالبولي إيثيلين جلايكول 8000 مع ثنائي فوسفات البوتاسيوم (PEG8000/PPH) . بحثتُ في هذه الدراسة تأثير خمسة عوامل:هي درجة الحرارة، وتركيز PEG8000، وتركيز فوسفات ثنائي البوتاسيوم، والأس الهيدروجيني، وإضافة كلوريد الصوديوم (NaCl) أو كبريتات المغنيسيوم (MgSO4) كمحفزعلى نسبة الاسترداد (%Rec)، ومعامل الفصل (KE) لإنزيم الإنفرتيز في ATPS خلال فترة الدراسة حقق النظام أعلى قدر من الاسترجاع (%Rec) بنسبة 87.52% وأعلى معامل فصل (KE) قدره 7.01 عند درجة حرارة 10 درجات مئوية، مع تركيز PEG8000 قدره 1.5 جم/10 مل، وتركيز فوسفات ثنائي البوتاسيوم 2.4 جم/ 10 مل، ودرجة حموضة 10. بعد إضافة الأملاح المحايدة، حقق النظام أعلى نسبة استرداد %Rec وقدره 91.9% وأعلى قيمة لمعامل الفصل KE وقدره 11.34 في ظل نفس الظروف المثالية، وتركيز MgSO4 قدره 1 جم/10 مل.