Abstract
The present investigation represents a preliminary study of the effect of crude extracts (aqueous, ethanolic and hexanic) of date pits (Phoenix dactylifera L. cv. Zahdi) on two malignant cell lines (human laryngeal carcinoma-Hep2 and murine mammary adenocarcinoma-AMN3) and one normal cell line (rat embryo fibroblast-REF). The study also includes evaluation of the effect of these extracts on several cytogenetic parameters such as mitotic index (MI%), blast index (BI%) and chromosomal aberrations (CA) after in vitro culture of peripheral blood lymphocytes. This work also includes a study of the therapeutic potential of one of these extracts in the treatment of transplanted murine mammary adenocarcinoma in mice.The in vitro cell growth assay showed that there was time- and concentration-dependent cytotoxic effects of crude extracts of date pits on Hep2 and AMN3 cell lines. The highest significant effect of these extracts was achieved after 72 hrs of exposure with the highest concentration (10000 μg/ml). Ethanolic extract of pits (EP) caused growth inhibition percentage 89.4%, 93.4% for Hep2 and AMN3 respectively. However, 72 hrs exposure to EP at concentration of 10000 μg/ml caused slight inhibitory effect on REF cell line, reaching 17.7%.On the other hand, the crude extracts of pits caused significant reduction in the mitotic index and blast index of peripheral human lymphocytes, but without any structural or numerical chromosomal aberrations. Also these extracts neither replaced phytohemagglutinin (PHA) as mitogenic agent, nor colcemide as mitotic arresting agent at metaphase. The therapeutic doses of EP were determined according to LD50 in mice. The results indicated high effectiveness of this extract in a dose- and time-dependent manner. The highest therapeutic doses of EP (1 gm/kg B.wt.) showed the best therapeutic effect by reducing the tumor volume in mice to about 83.8%.The comparison of relative tumor volumes of different groups revealed highly significant differences among all treated groups and those of untreated (control) group.
Abstract
تم تقييم تأثير المستخلصات الخام (المائي، الايثانولي والهكساني) لنوى نخيل التمر صنف الزهدي Phoenix dactylifera L. cv. Zahdi كدراسة أولية في اثنين من الخطوط الخلوية السرطانية، هما خط خلايا سرطان الحنجرة البشري (Hep-2) وخط خلايا سرطان الغدة اللبنية الفأري (AMN3)، وكذلك في الخط الخلوي الطبيعي لجنين الجرذ (REF)، وتقييم تأثير هذه المستخلصات في مزارع خلايا الدم المحيطي البشري في الزجاج (in vitro) بوساطة حساب معامل التحول الأرومي Blast index (BI%)، ومعامل الانقسام الخيطي Mitotic index (MI%)، ودراسـة حالات الزيغ الكروموسومي Chromosomal aberration (CA). كما تضمنت دراسة الفعالية العلاجية لأحد هذه المستخلصات في الفئران المختبرية الحاملة لسرطان الغدة اللبنية Mammary adenocarcinoma.كان التأثير السمّي للمستخلصات الخام في كلا خطي الخلايا السرطانية Hep-2 و AMN3 في الزجاج (in vitro) معتمداً على التركيز المستخـدم منها ومدة التعرض لها، وكان التأثير المعنوي الأعلى لتلك المستخلصات بعد 72 ساعة من تعريضها على الخلايا بالتركيز 10000 مايكروغرام/مل، فقد بلغت نسبة التثبيط الأعلى للمستخلص الايثانولي 89.4% و 93.4 % في خلايا Hep-2 و خلايا AMN3 على الترتيب. وقد أبدت المستخلصات جميعها تأثيرات تثبيطية طفيفة في خط الخلايا الطبيعية (REF)، حيث وصلت أعلى نسبة تثبيط في هذه الخلايا 17.7% عند التركيز 10000 مايكروغرام/مل للمستخلص الايثانولي. بيّنت دراسة تأثير المستخلصات الخام لنوى التمر في إنقسام الخلايا اللمفاوية للدم المحيطي البشري إنخفاضاً معنوياً في معدلات معامل التحول الأرومي (BI%) ومعامل الإنقسام الخيطي (MI%) بشكل يعتمد على التركيز المستخدم من تلك المستخلصات، ولم تُحدث هذه المستخلصات أي تغيرات تركيبية أو عددية في كروموسومات تلك الخلايا. إن التراكيز المستعملة جميعها من هذه المستخلصات لم تعمل كعوامل موقفة لإنقسام الخلايا اللمفاوية في الطور الإستوائي Metaphase عندما إستعملت بديلاً عن الكولسمايد Colcemid، فضلاً عن إنها لم تنجح بالعمل كعوامل مشطّرة بديلاً عن المادة المشطّرة Phytohemagglutinin (PHA).تم تحديد الجرع العلاجية من المستخلص الايثانولي للنوى إعتماداً على قيمة الجرعة المميتة النصفية (LD50). وأثبتت التجارب العلاجية فعالية عالية لهذا المستخلص في إختزال حجم الورم بشكل يعتمد على الجرعة المستخدمة منه ومدة التجريع. وكانت الجرعة العلاجية الأعلى له (1غم/كغم من وزن الفأرة) هي الأفضل تأثيراً من خلال إختزالها لحجم الورم في الفئران بنسبة 83.8%.تشير نتائج هذه الدراسة إلى الفعالية السميّة العالية للمستخلص الايثانولي للنوى في الخطوط الخلوية السرطانية Hep-2 و AMN3 بشكل متخصص دون إحداث تأثير سمي في الخلايا الطبيعية المتمثلة بخلايا REF، والمدى الواسع لسلامة استخدام هذا المستخلص في الفئران، والفعالية العالية ضد الورمية له عند استعماله في علاج سرطان الغدد اللبنية في الفئران.
Keywords
نوى تمر الزهدي، سرطان الدم، الفئران، تثبيط الخلايا السرطانية.